Aborto infeccioso por Neospora spp. em equino ˗ relato de caso / [Neospora spp infectious abortion in the horse ˗ case report]

O abortamento na espécie equina é responsável por grandes perdas econômicas e, entre as possíveis causas, está a neosporose, uma enfermidade que nem sempre é investigada como provável diagnóstico. Assim, o objetivo deste trabalho foi relatar um caso de aborto equino aos 129 dias de gestação, resultante da infecção por Neospora spp.. Amostras sanguíneas da égua e do feto abortado foram enviadas para um laboratório especializado. À necrópsia, constatou-se edema gelatinoso e hemorrágico em subcutâneo, fígado ictérico e friável com autólise de alguns órgãos, como baço, rins e glândulas adrenais. Fragmentos dos órgãos coletados na necrópsia foram submetidos à histopatologia e à pesquisa de agentes infecciosos, em que se identificou hepatite e epicardite não purulentas e onfalite purulenta, bem como exame positivo para Neospora spp. pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) convencional e Nested. O soro sanguíneo obtido da égua foi submetido à pesquisa de Neospora spp. pela técnica de imunofluorescência indireta, de herpesvírus por soroneutralização em cultura de células e de Leptospira sp. por PCR, todas com resultados negativos. Dessa forma, é importante considerar a neosporose como diagnóstico diferencial em casos de abortamento e natimortalidade, uma vez que a presença de cães nas propriedades é extremamente comum, representando uma importante fonte de infecção.(AU)

Abortion in the equine species is responsible for major economic losses, and among the possible causes is neosporosis, a disease that is not always investigated as a probable diagnosis. Thus, the objective of this study was to report an abortion at 129 days of gestation resulting from Neospora spp. Blood samples from the mare and the aborted fetus were sent to a specialized laboratory. Under necropsy, gelatinous and hemorrhagic edema was detected in subcutaneous tissue, friable and jaundiced liver with autolysis in spleen, kidneys and adrenal glands. Fragments of the organs collected at necropsy were submitted to histopathology and infectious agent tests, which identified non-purulent hepatitis and epicarditis and purulent omphalitis. Also, a positive result for Neospora spp. by the conventional and nested Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. Blood serum obtained from the mare was subjected to analyses to Neospora spp. by indirect immunofluorescence technique, herpesvirus by serum neutralization in cell culture and Leptospira sp. by PCR, all with negative results. Thus, it is important to consider neosporosis as a differential diagnosis in cases of abortion and stillbirth, since the presence of dogs in the properties is extremely common and represent an important source of infection.(AU)

Evaluation of embryo collection and transfer days on pregnancy rate of Mangalarga Marchador mares during the breeding season / Evaluación de los días de recolección y transferencia de embriones sobre las tasas de preñez en yeguas Mangalarga Marchador durante la estación de monta / Avaliação do dia da colheita e da transferência de embriões equino da raça Mangalarga Marchador durante a estação de monta

Abstract Background: Proper timing for embryo collection and transfer in horses -which is critical for the success of this biotechnology- is still debated. Additionally, there is little information on this technology under tropical conditions. Objective: To determine the best day for collection and transfer of embryos in Mangalarga Marchador mares under Brazilian northeast's conditions. Methods: Donors (n= 30) and recipients (n= 76) in diestrus phase were selected based on both clinical and gynecology examinations. Estrus was induced on both donor and recipient mares by intramuscular injection of 5 mg Dinoprost, aiming to obtain an ovulation interval of -1 to +3 between recipient and donor. Ovulation was induced with buserelin acetate when the largest follicle reached at least 35 mm in diameter. At this time, mares were subjected to artificial insemination at 48-hour intervals until ovulation. The embryos were collected on days 7, 8, and 9 after ovulation. Results: The embryo collection on day 8 was more efficient (p<0.05) than on day 7, but it was not more effective (p>0.05) than day 9, which presented the same efficiency (p>0.05) as day 7. From a total of 76 embryos transferred to the recipients, that were between days 4 and 9 after ovulation, there was no influence (p>0.05) of the day of transfer on pregnancy rate. Conclusions: The embryo collection must be performed on day 8 after ovulation, and transfer can be performed on any day of that interval (4-9) without affecting the pregnancy rate.

Resumen Antecedentes: El momento mas apropiado para la recolección y transferencia de embriones en equinos -que es fundamental para el éxito de esta biotecnología- continua siendo sujeto de estudio. Además, es escasa la información sobre esta tecnología en condiciones tropicales. Objetivo: Determinar el momento mas adecuado para la recolecta y transferencia de embriones en yeguas Mangalarga Marchador, en las condiciones del nordeste Brasileño. Métodos: Donadoras (n= 30) y receptoras (n= 76) en la fase de diestro se seleccionaron con base en los exámenes clínicos y ginecológicos. El estro de las yeguas donadoras y receptoras fue inducido con 5 mg de Dinoprost, vía intramuscular, intentando obtener un intervalo de ovulación de -1 a +3 entre la receptora y la donadora. La ovulación fue inducida con acetato de buserelina cuando el folículo mayor alcanzó 35 mm de diámetro. En ese momento, las yeguas fueron sometidas a inseminación artificial en intervalos de 48 horas hasta la ovulación. Los embriones fueron recolectados en los días 7, 8 y 9 después de la ovulación. Resultados: La recolecta de embriones en el día 8 fue más eficiente (p<0,05) que en el día 7, pero no fue más efectivo (p>0,05) que en el día 9, el cuál presentó la misma eficiencia (p>0,05) que en el día 7. De un total de 76 embriones transferidos a las receptoras, que se encontraban entre el día 4 y 9 después de la ovulación, no se registró influencia (p>0,05) del día de la transferencia en la tasa de preñez. Conclusiones: La recolecta embrionaria debe ser realizada el día 8 después de la ovulación, y la transferencia puede ser realizada en cualquier día de este intervalo (4 a 9) sin que se afecte la tasa de preñez.

Resumo Antecedentes: A importância do momentoda colheita e da transferência do embrião equino para o sucesso dessa biotécnica em equino continua sem ser completamente entendida. Adicionalmente, existe pouca informação sobre essa tecnologia em condições tropicais. Objetivo: Determinar o melhor dia para colheita e para transferência de embriões em eguas manga larga marchador nas condições do nordeste brasileiro. Métodos: Doadoras (n = 30) e receptoras (n = 76) na fase de diestro foram selecionadas com base nos exames clínico e ginecológicos. O estro das éguas doadoras e receptoras foi induzido com 5 mg de Dinoprost administrado por via intramuscular, buscando obter um intervalo de ovulação de -1 a +3 entre a receptora e a doadora. A ovulação foi induzida com acetato de buserelina quando o foliculo maior alcançou o tamanho de 35 mm de diâmetro. Nesse momento, as éguas foram submetidas a inseminação artificial em intervalos de 48 horas até a ovulação. Os embriões foram colhidos nos dias 7, 8 e 9 depois da ovulação. Resultados: A colheita de embriões no dia 8 foi mais eficiente (p<0,05) do que no dia 7, porem não foi mais efetivo (p>0,05) do que o dia 9, o qual apresentou a mesma eficiência (p>0,05) que o dia 7. De um total de 76 embriões transferidos para as receptoras que se encontravam entre os dias 4 e 9 depois da ovulação, não se registrou influência (p>0,05) do dia da transferência sobre a taxa de prenhez. Conclusões: A colheita embrionária deve ser realizada no dia 8 depois da ovulação, e a transferência pode ser realizada em qualquer dia desse intervalo (4-9) sem que a taxa de prenhez seja afetada.

Composition of milk and mammary gland health in Criollo breed mares during lactation / Composição de leite e saúde de glândulas mamárias em éguas da raça Crioula durante lactação

The aim of this study was to evaluate the components of milk and mammary gland health of Criollo mares. A total of 12 mares coming from a farm in southern Brazil were used. Samples of milk were taken from each mare every two weeks up to 180 days of lactation. The characteristics analyzed were fat, protein, lactose, total solids, somatic cell count (SCC) and total bacterial count (TBC). In relation to the health of the udder and the milk of the mares, the SCC was 24.1 x 103cells / ml and TBC was 44 x 103CFU / ml, while the average of milk components was 0.57% fat, 1.95% protein, 6.71% lactose and 9.24% total solids. Stage of lactation and individual characteristics may influence the level of milk components. The low SCC and TBC found in the Criollo breed mares' milk ensure the quality of their milk compared to other species.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os componentes do leite e a saúde das glândulas mamárias de éguas da raça Crioula. Foi utilizado um total de 12 éguas, localizadas em uma fazenda no sul do Brasil. Foram retiradas amostras de leite de cada égua quinzenalmente até 180 dias de lactação. As características analisadas foram gordura, proteína, lactose, sólidos totais, contagem de células somáticas (CCS) e contagem bacteriana total (CBT). Em relação à saúde do úbere e ao leite das éguas, a CCS foi 24,1 x 10 3 células/mL e a CBT foi 44 x 10 3 UFC/mL, enquanto a média dos componentes do leite foi 0,57% de gordura, 1,95% de proteína, 6,71% de lactose e 9,24% de sólidos totais. O estágio da lactação e as características individuais podem influenciar o nível de componentes do leite. As baixas taxas de CCS e CBT encontradas no leite de éguas da raça Crioula asseguram a qualidade desse leite comparado ao de outras espécies.(AU)

Abortion in association with transplacental Theileria equi infection in a mare from the State of Espírito Santo, southeast Brazil: case report / Aborto equino associado à infecção transplacentária de Theileria equi, Espírito Santo, Brasil: relato de caso

Equine piroplasmosis is a tick-borne disease caused by the protozoan parasites Babesia caballi and Theileria equi. We report a case of abortion in association with transplacental Theileria equi infection in a mare from the State of Espírito Santo, southeast Brazil. An apparently healthy mare aborted at the tenth month of gestation. At necropsy, the subcutaneous tissue, skeletal muscles, and visible mucosae of the aborted fetus were pale, and there was moderate hydrothorax and marked splenomegaly. Microscopic findings included splenic lymphoid hyperplasia and nephrosis. Merozoite-infected erythrocytes were found within blood vessels of all organs examined and were most numerous in the brain. DNA extracted from the spleen, liver, kidney, and thymus was used as a template for PCR. Generic primers were employed for the detection of piroplasm 18S ribosomal gene. All samples were positive for piroplasm DNA by PCR. Amplicons were purified and then sequenced. Sequencing analysis of these amplicons revealed 98% identity to T. equi sequences. Based on our findings, we suggest that abortion in this case resulted from transplacental Theileria infection.(AU)

A piroplasmose equina é transmitida por carrapatos, sendo causada pelos protozoários Babesia caballi e Theileria equi. O objetivo deste trabalho foi relatar um caso de aborto equino associado à piroplasmose fetal. Uma égua gestante, aparentemente saudável, abortou no 10º mês de gestação. Na necropsia do feto, foi observada palidez de subcutâneo, da musculatura esquelética e das mucosas visíveis, moderado hidrotórax e acentuada esplenomegalia. Histologicamente, havia hiperplasia linfoide esplênica e nefrose. Muitos merozoítos foram observados em eritrócitos nos vasos sanguíneos de todos os órgãos examinados, com maior intensidade no encéfalo. Amostras de DNA do baço, fígado, rim e timo foram utilizadas para PCR com primers genéricos para detecção de sequências do gene 18S ribossomal de piroplasmas, com resultado positivo para todas as amostras. Em seguida, os amplicons das amostras de baço foram purificados, sequenciados e, após análise, mostraram 98% de identidade com a sequência de T. equi. Portanto, as alterações microscópicas, os resultados de PCR e sequenciamento confirmam aborto associado à T. equi por transmissão transplacentária.(AU)

Placentitis bacteriana como causa de aborto en yeguas: reporte de caso / Placentitis Bacterial as a cause of abortion in mares: Case Report / Placentite causa bacteriana de aborto em éguas: relato de caso

Resumen La placentitis en yeguas ocasionada por bacterias es una de las causas más importantes de abortos, en Colombia no existe evidencia escrita de su presentación. En el presente artículo se reporta el caso de una yegua Silla Francesa de 10 años de edad, que abortó a los 9 meses de gestación y fue atendida en la Clínica Veterinaria San Jorge - Escuela de Equitación Ejército Nacional en Bogotá. La paciente presentó signos de lactancia prematura y se observó engrosamiento de la placenta, además en los hallazgos histopatológicos predominan cambios vasculares (congestión, edema y fibrina) lo que indica una placentitis aguda. En la tinción de Gram de la placenta se encontraron cocobacilos gram negativos adheridos a la superficie de las células de las vellosidades corioalantóicas y entremezclados con el material proteináceo, aparentemente algunos se ubican intracelularmente; asociando estos fenómenos a un proceso infeccioso por posibles enterobacterias (E.coli o Salmonella spp).

Abstract Placentitis in mares caused by bacteria is one of the most important causes of abortions, there aren't any documented cases in Colombia as of yet. In this article, we take a look at a particular case of a "Silla Francesa" mare 10 years of age. The Mare had an abortion at 9 months of gestation and was treated at the Veterinary Clinic San Jorge - Army Equitation School from Bogota. The mare suffered from a premature lactation and presented thickening in the placenta which indicated placentitis, showing signs of vascular changes (congestion, edema and fibrin).In gram staining of placenta, It was found a negative gram coccobacilli adhered to the surface of the chorioallantoic villus cells and mixed with the proteinaceous material, apparently some are located intracellularly, confirming the process of infection potentially due to the presence of enterobacteias. (E.coli or Salmonella sp).

Resumo O placentite em éguas causadas por bactérias é uma das mais importantes causas de abortos, na Colômbia não está escrita a apresentação de provas. Este artigo relata o caso de uma égua cadeira francesa de 10 anos de idade, que o aborto aos 9 meses de gestação e foi tratado na Clínica Veterinária São Jorge - Escola de Equitação do Exército em Bogotá. O paciente apresentou sinais de lactação prematura e espessamento foi observado indicando placentite placenta porque predominantemente alterações vasculares agudas (edema, congestão e fibrina). Na coloração de gram da placenta, cocobacilos gram-negativo foi encontrada aderida à superfície das células das vilosidades corioalantóicas e misturado com o material proteico, aparentemente algumas estão localizadas intracelularmente, o que confirma o processo de potencial infeccioso de enterobactérias (E. coli ou Salmonella sp).

Taxa de recuperação e características morfológicas de embriões muares (Equus caballus x Equus asinus) / Recovery rate and morphologic features of cross bred embryos (Equus caballus x Equus asinus)

A Transferência de Embrião (TE) contribuiu efetivamente para a produção de equinos e outras espécies. O mercado de muares tem apresentado um contínuo crescimento, entretanto, a aplicação das biotecnologias para a produção desses animais ainda é escassa. O presente estudo avaliou a taxa de recuperação embrionária e as características dos embriões provenientes do cruzamento de éguas com jumentos. Os embriões foram recuperados entre os dias 6 e 9 após a ovulação, dessa forma foi realizada a avaliação da taxa de recuperação embrionária e avaliação das características relacionadas com a idade, morfologia e diâmetro embrionário. A taxa de recuperação embrionária total foi de 55,9% (71/127), e não apresentou diferença para as colheitas realizadas em diferentes dias (D6-D9). Foram recuperados embriões nos estágios de mórula, blastocisto inicial, blastocisto e blastocisto expandido. O tamanho dos embriões variou entre 147-1688μm e a média do diâmetro de todos os embriões recuperados foi de 438,04μm. A recuperação de embriões muares pode ser realizada entre os dias 6 e 9 após a ovulação, e propicia a recuperação de embriões nos primeiros estágios de desenvolvimento.(AU)

Production biotechnologies, particularly embryo transfer (ET) has constantly been contributed to reproduce horses and other species. The mules market has shown continuous growth, however, the biotechnology for mule assisted reproduction is still scarce. The aim of this study was to evaluate the embryo recovery rate and the features of the embryos from mares bred with donkeys. The embryos recovery attempts were performed on days 6 to 9 after ovulation, in order to evaluate the embryo recovery rate and the features related to age, morphology and embryonic diameter in each day. The overall embryo recovery rate was 55,9% (71/127), and there was no significant difference (p>0,05) on different days (D6-D9). Embryos were recovered in stages of mórula, early blastocyst, blastocyst and expanded blastocyst. The diameter of the embryos ranged from 147-1688μm and the mean diameter of all the embryos collected was 438,04μm. The collection of hybrid embryos might be performed between days 6 and 9 after ovulation, and provides recovery of embryos in the early stages of development.(AU)

Identificação dos colágenos I, III, IV e α-SMA e participação dos miofibroblastos no processo fibrótico das endometroses equinas / Identification of collagens types I, III, IV and α-SMA and the participation of myofibroblasts in the fibrotic process in equine endometrosis

A endometrose é uma alteração degenerativa das glândulas uterinas e do estroma circundante, caracterizada pelo arranjo periglandular de miofibroblastos e pela deposição de matriz extracelular (ECM). O presente trabalho objetivou avaliar a expressão de colágenos tipos I, III e IV e α-actina de músculo liso (α-SMA) nas endometroses equinas, procurando esclarecer a participação dos miofibroblastos na progressão desses processos. Foram utilizadas 24 biópsias uterinas com diagnóstico de endometrose, recebidas pelo Serviço de Patologia Veterinária e de Reprodução Animal da FMVZ, Unesp, Botucatu, SP. Cortes histológicos foram submetidos às técnicas histoquímicas de tricrômico de Masson, picrosirius red sob luz polarizada e ácido periódico de Schiff (PAS) e imuno-histoquímicas para os três tipos de colágeno citados e α-SMA. Ainda, traçou-se um paralelo entre a técnica de picrosirius red e a imunomarcação dos colágenos tipos I e III. A análise histológica revelou que as fibras de colágeno denso correspondem ao colágeno tipo I, predominantes nas endometroses inativa e inativa destrutiva. As fibras de colágeno frouxo correspondem ao colágeno tipo III, predominantes nas endometroses ativas e ativas destrutivas. Nesses mesmos processos, a membrana basal revelou espessamento, aparentemente não relacionado ao colágeno tipo IV, e uma maior imunomarcação de miofibroblastos periglandulares em relação às endometroses inativa e inativa destrutiva. Dessa forma, nota-se que os miofibroblastos estão relacionados ao aumento na deposição de colágeno tipo III nos ninhos fibróticos ativos.(AU)

Endometriosis is a degenerative change of the uterine glands and surrounding stroma, characterized by periglandular arrangement of myofibroblasts and deposition of extracellular matrix (ECM). The aim of this study was to evaluate the expression of collagen type I, III and IV and α-smooth muscle actin (α-SMA) in equine endometriosis, and investigate the role of myofibroblasts in the progression of these processes. A parallel was made with histochemical techniques of Masson's trichrome, Picrosirius Red under polarized light and Periodic Acid-Schiff (PAS). Twenty four uterine biopsies received by the Veterinary Pathology Service and Animal Reproduction of FMVZ, UNESP, Botucatu, SP, were diagnosed with endometriosis. Histological analysis revealed that the orange dense collagen fibers correspond to type I collagen, being prevalent in inactive and inactive destructive endometriosis. The green loose collagen fibers correspond to type III collagen, and are predominant in active and active destructive endometriosis. In the same processes, a greater amount of periglandular myofibroblasts were observed in comparison to inactive and inactive destructive endometriosis. The presence of these cells in active processes are strongly related to an increased deposition of collagen type III in fibrotic nests. Regarding the basement membrane, the active destructive and active endometriosis shows thickening, apparently not related to an increase in expression of type IV collagen. The active destructive and inactive destructive endometriosis exhibited disruption areas in type IV collagen fibers. Thus, it is noted that the myofibroblasts are related to increased deposition of type III collagen in active fibrotic nests.(AU)

Expression of proliferating cell nuclear antigen in the endometrium of mares during estrus and at early diestrus / Expressão do antígeno núcleo celular proliferante no endométrio de éguas durante o estro e início do diestro

Immunohistochemical expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) was evaluated in the endometrium of mares during estrus and at early diestrus. Three samples were collected by endometrial biopsy from 10 mares, on estrus/ second day, in the ovulation day and seven days after the ovulation day. PCNA expression was high in luminal epithelium and low in endometrial glands on samples taken on estrus/second day and on the ovulation day (p 0.05). For samples collected on the seventh day following ovulation, the averaged PCNA immunostaining was higher in glandular epithelium (p 0.05). The study revealed that luminal epithelial cells exhibit higher proliferation during estrus and glandular epithelial cells exhibited higher proliferation during diestrus...

A expressão do antígeno núcleo celular proliferante (ANCP) foi avaliada no endométrio de éguas durante o estro e início do diestro. Em cada uma de dez éguas foram efetuadas biópsias do endométrio em três momentos dos respectivos ciclos reprodutivos: segundo dia do estro, dia da ovulação e sete dias após a ovulação. Nas amostras colhidas no segundo dia do estro e no dia da ovulação, a expressão do ANCP foi elevada no epitélio luminal e baixa nas glândulas endometriais (p 0,05). Nas amostras colhidas no sétimo dia após a ovulação, a média de ANCP imunologicamente corado foi maior no epitélio glandular (p 0,05). O estudo revelou que as células do epitélio luminal apresentaram a maior proliferação durante o estro e que as células epiteliais glandulares apresentaram a maior proliferação durante o diestro...

Endometrite fúngica em éguas: diagnóstico e implicações clínico-patológicas / Fungal endometritis in mares: diagnosis and clinicopathological aspects

Este estudo objetivou estabelecer a etiologia e achados clínico-patológicos das endometrites fúngicas. Para tal, realizou-se anamnese, exame ginecológico, cultura, citologia e biópsia endometriais em 85 éguas em idade reprodutiva e que não pariam havia um ano ou mais. Das 85 éguas, 24 (28%) apresentaram exames compatíveis com endometrite infecciosa. Destas, em 20% (5/24), confirmou-se endometrite com envolvimento fúngico. Os fungos isolados foram: Candida guilliermondii, C. tropicalis, C. pseudotropicalis associadas ao Bacillus sp. em uma égua; C. albicans em duas fêmeas (uma associada a Escherichia coli); um caso de Trichosporon penicillatum e um de T. capitatum. Todos animais diagnosticados com endometrite fúngica apresentaram inflamações endometriais moderadas, nos exames de citologia e no histopatológico, sendo estes achados compatíveis com o histórico e o exame reprodutivo destes animais. Destacou-se a presença constante de linfócitos e plasmócitos nos dois exames, assim como das lesões degenerativas no endométrio através da biópsia endometrial. Em 80% (4/5) constataram-se estruturas fúngicas na citologia endometrial, porém no exame histopatológico, não foi possível detectar tais estruturas. Após o estudo pode-se afirmar que a metodologia utilizada foi eficiente para diagnosticar a endometrite fúngica, com destaque para o exame de citologia endometrial, e que este tipo de endometrite teve caráter crônico em todos os animais.

The aim of the present study was to determine the causes and clinical findings of endometritis. The history, reproductive examination and endometrials culture, uterine cytology and biopsy from 85 mares in reproductive age that did not foal a year or more were performed. Twenty four (28%) out of 85 mares had signals compatible with infectious endometritis. From those, 20% (5/24) had fungal involvement, and the agents were: Candida guilliermondii, C. tropicalis, C. pseudotropicalis, in association to Bacillus sp. in one mare; two mares had C. albicans, and one of them associated with Escherichia coli; a case of Trichosporon penicillatum and another of T. capitatum. All animals with fungal endometritis presented moderate endometrial inflammation, at cytology and uterine biopsy, which was compatible with the animal's history and reproductive exam. The endometrial cytology and biopsy revealed numerous lymphocytes and plasmocytes as well as the degenerative lesions in the endometrial biopsy. Fungal structures were presented at the endometrial cytology smears in 80% (4/5) of the mares, however those structures were not detected in the biopsy. In conclusion, the methodology used was efficient to diagnose fungal endometritis, with standing for the examination of endometrial cytology, and the fungal endometritis had chronic character in all animals.

Estudo dos métodos de rotina diagnóstica de mastite no leite de éguas / Study of routine diagnosis methods of mastitis in mares

Routine diagnosis methods used in bovine mastitis were studied in 55 mares in lactation. The findings of strip cup test, California Mastitis Test-CMT, electronic somatic cell count-CCS, microbiological culture, and in vitro antimicrobial susceptibility profile of isolates were discussed. Streptococcus spp., Staphylococcus spp, and enterobacteria were the most common microorganisms isolated in health and CMT-positive mammary glands. Staphylococcus aureus and Arcanobacterium pyogenes were identified in two mares presenting clinical mastitis. Mean somatic cell count of eight mares without presence of microorganisms in milk was 247.57x10³/mL and 1.621,86x10³/mL in 47 mares with positive microbiological culture. Moderate concordance (63.8 percent) between positive reactions in CMT (1 to 3+) and microbiological culture was observed. Amicacin (78.9 percent), ceftiofur (74.7 percent), sulpha-trimetoprim (69,0 percent) and norfloxacin (69.0 percent), were the most effective drugs, while resistance of isolates was mainly observed against penicillin (64.8 percent), gentamycin (35.2 percent), azithromycin (35.2 percent), enrofloxacin (28.2 percent), and florfenicol (28.2 percent).

Aplicação da ultrassonografia colorida doppler em programas de transferência de embriões equinos / Potential use of doppler ultrasound in equine embryo transfer programs

Os programas comerciais de transferência de embriões em éguas existem por mais de três décadas e são hoje uma das biotécnias mais utilizadas na reprodução assistida de equinos. O exame ultrassonográfico nos períodos pré e pós-cobertura de doadoras de embriões, assim como a avaliação de receptoras no momento da inovulação é de vital importância para o êxito de um programa de transferência de embriões. A ultrassonografia Doppler é uma técnica não-invasiva que permite a avaliação em tempo real da hemodinâmica do trato reprodutivo de animais de grande porte. Por fornecer detalhes anatômicos e informações imediatas sobre a fisiologia do fluxo sanguíneo de tecidos e órgãos, o exame doppler permite a avaliação do potencial ovulatório de folículos e do status funcional de corpo lúteo e útero, além de ser uma técnica auxiliar para o diagnóstico de distúrbios na hemodinâmica do sistema reprodutivo. Alterações na perfusão sanguínea dos futuros folículos dominantes são detectáveis em diferentes fases de seu desenvolvimento, como na divergência folicular e no período pré-ovulatório. A partir dessas informações, é possível determinar o princípio da atividade sexual e o momento ideal para o início de tratamentos superovulatórios e indutores de ovulação, assim como o momento mais apropriado para a realização de coberturas de éguas doadoras de embriões. A avaliação através do modo-Doppler do corpo lúteo e útero de éguas receptoras é também um instrumento auxiliar para a seleção de animais com perfil sérico de progesterona e ambiente uterino adequados para a sobrevivência do embrião e manutenção da gestação. Essa técnica pode ser útil ainda ao se avaliar a interação concepto-maternal. Apesar da aplicabilidade da tecnologia doppler dentro de programas de transferência de embriões, novos estudos visando a determinar padrões de normalidade e posterior caracterização de distúrbios de fluxo sanguíneo de trato reprodutivo ainda se fazem necessários.

Embryo transfer in mares has been commercially used for more than three decades and it is one of most frequently applied biotechnologies on equine reproduction. Ultrasonic doppler exam of donors during the pre and post-breeding and recipients evaluation at the embryo transfer moment is essential for embryo transfer program success. Doppler ultrasonography is a non-invasive technic that allows real-time evaluation of the reproductive system hemodynamics in large animal. For providing anatomical details and blood-flow physiologic information of vessels and tissues, doppler exam can be used for ovulation prognostication, and to evaluate uterine and luteal functional status. Additionally, it can serve as a diagnostic aid of hemodynamic disturbance in reproductive system. Vascularity changes of future ovulatory follicles precede the diameter deviation. Based on this, it is possible to estimate the beginning of the breeding season and the best moment to initiate superovulatory treatments. Moreover, follicular blood flow can be used to decide the most appropriated moment for ovulation induction and breeding of donors mares. Uterine and luteal evaluation using Doppler-mode in mares can be useful to select embryo recipients with satisfactory progesterone production and adequate uterine vascularity for embryo development and maintenance of pregnancy. The maternal recognition of pregnancy also can be evaluated. Although the applicability of the Doppler technology in embryo transfer programs, additional studies are necessary to determine the standards of normality and to characterize different blood-flow disturbances of the reproductive system.

Diagnóstico bacteriológico, citológico e histopatológico da endometrite equina

A endometrite é uma das principais causas de infertilidade equina, com considerável impacto econômico. Porém, não existeconsenso sobre o método ideal de diagnóstico. O objetivo deste estudo foi avaliar os achados bacteriológicos, citológicose histopatológicos de 21 éguas com histórico de infertilidade. Escherichia coli (10 cepas), estreptococos do grupo C [(EGC),Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (4) e Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis (3)], Enterococcus sp. (3) eStaphylococcus aureus (2) foram isolados de secreção uterina de 13 animais. Em oito animais foram isoladas espécies nãopatogênicas. Resistência à cefalotina, clindamicina, eritromicina, penicilina e tetraciclina foi observada entre as espécies.Esfregaços contendo células da parede uterina foram classificados quanto ao grau de inflamação em leve (6), moderada ouintensa (12) e ausência de inflamação (3). Infiltrados celulares foram observados em todos os fragmentos de biópsia, comgrau de intensidade variando entre moderado e intenso. O isolamento de E. coli foi significativamente associado à inflamaçãointensa, enquanto a presença de espécies não patogênicas foi significativamente relacionada com a ausência de processoinflamatório.

Falla ovárica en una yegua de paso fi no colombiano:tratamiento combinado homeopático antihomotóxicoy hormonal: reporte de un caso / Fracasso ovário em uma égua de passo colombiano: manipulação homeopática antihomotoxicae hormonal combinada: reporte de um caso / Ovulation failure in a Colombian Paso fino Mare: A combined antihomotoxic homeopathic therapy and hormonal treatment: a case report

La falla ovulatoria es una de las principales causas de infertilidad en yeguas cíclicas. En el presentecaso, se describe el seguimiento de una yegua nulípara de paso fino colombiano de seis años que ingresóa consulta para ser sometida a reproducción. Al examen ecográfico se le halló el ovario izquierdo de 15x 13 cm con una estructura patológica de aspecto anecóico y contenido líquido de 13 x 11 cm, el ovarioderecho sin estructuras y el útero flácido. La yegua fue sometida a tratamiento con antihomotóxicos deltipo Ovarium compositum®, Damiana injeel®, Cerebrum compositum®, y Phosphor hommacord® durante1½ mes, y terapia FK (terapia neural, dos en 15 días), lo cual disminuyó el tamaño del folículo y delovario, indujo ablandamiento de la pared folicular y leve respuesta uterina. Un mes y medio después,el ovario izquierdo tenía 13 x 11 cm y un folículo de 9 x 8 cm, y el ovario derecho estaba multifolicular.Las concentraciones de progesterona, estradiol y testosterona eran características de anestro. La yeguafue tratada con eCG (3.000 UI/3 días, i.v.), cuatro días después la progesterona ascendió a 14.91 ng/dl, el examen ecográfico reveló un cuerpo lúteo en el ovario izquierdo y a los siete días fue tratada conPGF2α (9 μg/kg/2 días) intramuscular. Cinco días después la yegua presentó estro, fue inseminada y tuvouna gestación que perdió a los 40 días; luego presentó un nuevo estro a los 20 días, fue inseminada, sele confirmó gestación a los 20 días y tuvo una gestación a término con un potro viable al momento del parto. Este caso sugiere la posibilidad de combinar terapia hormonal con medicina alternativa para eltratamiento de algunos tipos de anormalidades en el funcionamiento ovárico en las yeguas.parto. Este caso sugiere la posibilidad de combinar terapia hormonal con medicina alternativa para eltratamiento de algunos tipos de anormalidades en el funcionamiento ovárico en las yeguas.

Ovulation failure is one of the most frequent causes of infertility in mares. In the present case wereport a six-year-old Colombian Paso Fino maiden Mare that was attended for breeding purposes with aprevious history of ovulation failure. At ultrasound (US) examination of the reproductive tract and ovariesthe left ovary measured 15 x 13 cm and a pathologic 13 x 11 cm diameter anecoic structure was diagnosed.The right ovary was found of normal size, and the uterus was found flacid. An anti homotoxic theraphywith Ovarium compositum®, Damiana injeel®, Cerebrum compositum®, and Phosphor hommacord® for1½ months and FK (neural) therapy (twice/15 days) were then established, the ovary size was reduced,and softening of the follicular wall and a slight uterine response were observed. After 1½ month, the leftovary had 13 x 11 cm diameter and showed a 9 x 8 cm follicle, whereas the right ovary was multifollicular.Serum progesterone, estradiol and testosterone levels were those characteristics of an anestrous mare.The mare was treated with hCG (3.000 UI, i.v./3 days) and 4 days later a corpus luteum was diagnosedby US in the left ovary and serum progesterone levels raised to 14.91 ng/dl. At day 7 after hCG treatmentthe mare was given PGF2α (9 μg/kg/for two days) intramuscular, estrous was evident 5 days later, andartificial insemination (AI) with fertile semen was practiced resulting in a viable pregnancy as evaluatedby ultrasound at day 20; however, this pregnancy was lost at 40 days after AI. The mare returned to estrus20 days later, she was then inseminated and the resulting pregnancy was confirmed at day 20th resultingin a successful gestation and foaling of a full term viable foal. This report suggests hormonal therapy andalternative medicine could be successfully combined for treatment of specific ovarian pathologies in mares.

O fracasso ovulatório é uma das principais causas de infertilidade em éguas cíclicas. Neste caso, sedescreveu o acompanhamento de uma égua nulípara da paso fino colombiano, de seis anos idade queconsultou para serem sujeitos a reprodução. No exame ultra-som que ele encontrou o ovário esquerdo,15 x 13 cm, com uma estrutura patológica de 13 x 11 cm, o ovários direito sem estruturas e útero mau. Aégua sofreu tratamento com drogas Ovarium compositum®, Damiana injeel®, Cerebrum compositum®, ePhosphor hommacord® durante 1½ mês, FK terapêutica (terapia neural, duas em 15 dias), o que diminuiuo tamanho do folículo e do ovário, induzida amolecimento da parede uterina e leve resposta folicular.Um mês e meio depois, o ovário esquerdo tinha 13 x 11 cm e um folículo 9 x 8 cm, e do ovário direito foimultifolicular. As concentrações de progesterona, estradiol e testosterona foram características do anestro.A égua foi tratada com eCG (3.000 UI IV/3 dias), quatro dias após a progesterona ascendeu a 14.91 ng/dl, efoi visto por ultra-som corpo lúteo no ovário esquerdo. Em sete dias, a égua foi tratada com PGF2α (9 μg/kg/2 dias) i.m., introduzido estro após cinco dias, foi inseminada e teve uma gestação que perdeu a 40 dias;introduziu um novo estro em 20 dias, foi inseminação, a gravidez foi confirmada em 20 dias e atualmentemantém um 9 meses de gestação. Este caso sugere a utilidade da terapia hormonal combinando commedicina alternativa para o tratamento de certos tipos de anomalias no funcionamento do ovário em éguas.

Fertilidade de éguas inseminadas no corpo ou no ápice do corno uterino com diferentes concentrações espermáticas / Fertility of mares inseminated in the uterine corpus or tip with different sperm concentrations

Foram utilizados 72 ciclos estrais de 37 éguas mestiças, com idade variando de quatro a 20 anos, distribuídas ao acaso em dois grupos experimentais (G I e G II) para estudar o efeito do local de deposição do sêmen no sistema genital sobre a fertilidade. As inseminações no ápice do corno uterino (G II) foram realizadas por via intravaginal profunda, utilizando-se a pipeta de inseminação IVI pippette (75cm), contendo 1/5 (3mL) da dose inseminante utilizada para o corpo do útero (15mL-G I). As éguas foram rufiadas diariamente e inseminadas às segundas, quartas e sextas-feiras, a partir de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, com sêmen fresco diluído em diluidor de leite desnatado-glicose. Apenas um garanhão de 20 anos e de fertilidade conhecida foi utilizado. As taxas de concepção/ciclo para as inseminações realizadas no corpo (42,9 por cento-15/35) e ápice do corno uterino (45,9 por cento-17/37) com concentrações médias de 489 e 102 milhões de espermatozoides móveis, respectivamente, não foram diferentes (P>0,05).

Seventy-two estral cycles of 37 mares, aging from four to 20-year-old, were randomly distributed in two experimental groups (G I and G II). The aim of the study was to evaluate the effect of the semen deposition placed in the female genital system on the fertility. The inseminations in uterine horn tip (G II) were carried out by deep intravaginal way, using the pipette of insemination IVI pippette (75cm), containing 1/5 (3mL) of the inseminant dose of that utilized in uterine body or horn (15mL-G I). The mares were daily teased and inseminated on Mondays, Wednesdays, and Fridays, starting from a follicle from 3.0 to 3.5cm diameter, with fresh semen diluted in skim milk glucose extender. Only one 20 year-old stallion with wellknown fertility was utilized. The conception rates/cycles for inseminations carried out in the uterine body (42,9 percent-15/35) and in the uterine horn tip (45,9 percent-17/37) utilizing average concentrations of 489 and 102 million of mobile spermatozoa, respectively, did not present difference (P>0.05).

A administração de hCG incrementa a incidência de ovulações duplas e múltiplas em éguas da raça Campolina apresentando folículos codominantes? / Does hCG administration increase the incidence of double and multiple ovulations in Campolina mares with co-dominant follicles?

A gonadotrofina coriônica humana (hCG) é rotineiramente empregada na indução de ovulação em éguas. A incidência de duplas ovulações é variável, sendo comum em determinadas raças brasileiras, como Brasileiro de Hipismo e Campolina. O objetivo deste trabalho foi avaliar se a administração de hCG em éguas da raça Campolina incrementa a incidência de ovulações duplas e múltiplas. Através de palpação retal e ultrassonografia, foram avaliados dois ciclos estrais de 104 éguas, divididas em dois grupos. À detecção de um ou mais folículos ³35 mm e edema endometrial grau 2, 2.500 IU de hCG (IV) eram administrados às éguas do grupo I. O grupo II serviu como controle. Os resultados obtidos foram analisados pelo Qui-quadrado. A incidência de ovulações duplas nos grupos I e II foi de, respectivamente, 32,7% (34/104) versus 30,8% (32/ 104). Ambos os grupos obtiveram incidência semelhante de ovulações triplas (1,9% - 2/104). Apenas uma ovulação quádrupla (1,0% - 1/104) foi detectada, no grupo controle. A incidência de duplas e múltiplas ovulações foi similar entre os grupos (p > 0,05). Pelo fato das éguas da raça Campolina apresentarem, fisiologicamente, considerável incidência de ovulações duplas e múltiplas, é possível que a administração de hCG não tenha influenciado estes padrões ovulatórios.

The human chorionic gonadotrophin (hCG) has been routinely used in the equine species to induce ovulations for more than four decades. The incidence of multiple ovulations in horses is variable, being double ovulations a common occurrence in some Brazilian breeds, such as Brasileiro de Hipismo and Campolina. The aim of this work was to evaluate the role of hCG administration to increase, in Campolina mares, the incidence of double and multiple ovulations, which are desirable in embryo transfer programs. One hundred and four (104) mares had their estrous cycles recorded through rectal palpation and ultrasonographic evaluation during the breeding season of 2003 - 2004, in a total of two hundred and eight (208) cycles (two cycles per mare). Animals were allocated in two groups, with fifty two (52) horses each. In Group I mares, once one or more = 35 mm follicles and grade 2 uterine edema were present, 2.500 IU of hCG were intravenously administered. The untreated mares in Group II served as control. The Chi-Square test was used to analyze obtained results. The incidence of double ovulations in groups I and II was, respectively, of 32.7% (34/104) versus 30.8% (32/104). The incidence of triple ovulations was low in both groups, of 1.9% (2/104). Only once in the control group (1.0% - 1/104) was a quadruple ovulation detected. There was no difference in the incidence of double and multiple ovulations between both groups (p > 0.05). Possibly, hCG administration did not influence ovulation patterns in this work due to the fact that Campolina breed mares physiologically show a considerable incidence of double and multiple ovulations.

Estudo comparativo de éguas repetidoras ou não de cio através da avaliação histológica do endométrio e das concentrações plasmáticas de progesterona / Comparative study of repeat breeds and healthy mares through endometrial histology and plasmatic progesterone concentrations

O trabalho teve como objetivo geral fazer um estudo comparativo da histologia endometrial e das concentrações plasmáticas de progesterona (P4) em éguas, repetidoras ou não de cio. A hipótese do presente estudo é que existe correlação entre o histórico de infertilidade, os achados histopatológicos e a concentração de P4 destes animais. Para tanto, foram utilizadas 36 éguas, em idade reprodutiva (3-23 anos), das raças Mangalarga Marchador e Campolina. Utilizaram-se éguas não repetidoras (n=11) como grupo controle, sendo 4 éguas doadoras e 7 receptoras; e repetidoras de cio (n=25), 15 doadoras e 10 receptoras. Tal classificação foi realizada de acordo com o histórico reprodutivo destes animais. Amostras de endométrio foram coletadas para a realização de avaliação histopatológica e amostras de sangue para a mensuração das concentrações plasmáticas de progesterona. Os fragmentos de tecido endometrial obtidos pela biópsia foram fixados no Fixador de Bouin. Posteriormente os fragmentos foram processados e incluídos em parafina. Os cortes foram corados por Hematoxilina-Eosina (HE) para exame histopatológico. As concentrações plasmáticas de P4 foram mensuradas pelo método de enzima-imunoensaio (ELISA). Não foi observada correlação entre as concentrações de P4 e a subfertilidade, sendo estas variáveis tratadas como independentes. Houve uma correlação positiva entre a idade e a subfertilidade (p<0.05), assim, quanto mais velha a égua, maior a subfertilidade. Foi observada uma correlação entre a categoria da biópsia e a subfertilidade (p<0.05), ou seja, quanto mais alterações histológicas, maiores as chances da égua ser subfértil. Contudo, nem todas as éguas classificadas na Categoria I e II levaram a gestação a termo e nem todas da Categoria III tiveram falhas na reprodução, pois, deve-se considerar que outros fatores podem influenciar na manutenção da gestação. A biópsia endometrial demonstrou ser uma técnica fácil, segura, barata e com um desconforto...

The study aimed to compare endometrial histology and plasmatic progesterone (P4) concentration of repeat breeds and healthy mares. The hypothesis was that there is a correlation between infertility and endometrial histology and P4 concentration in both groups. A total of 36 Campolina and Mangalarga Marchador mares in reproductive age (3-23 years) were used, 11 of them were healthy mares (Control group, 7 embryo recipient and 4 embryo donors), and 25 repeat breeders (10 embryo recipient and 15 embryo donors), classified as based on their reproductive history. Endometrial and blood samples were collected for respectively histological and plasma progesterone concentration evaluation. The endometrial samples obtained after biopsy were fixed in Bouin's fluid, processed, included in paraffin, and stained with Hematoxylin-Eosin (HE) for histopathological examination. Plasmatic progesterone concentrations were evaluated by enzyme immunoessay (ELISA). There was no correlation between progesterone concentration and fertility. But there was a positive correlation between age and fertility, as older mares had major tendency of subfertility than younger ones. There was also a correlation between biopsy categories and fertility, as more histological alterations were found, higher were the chances for the mares to be subfertile. However not all mares classified as Category I and II maintained pregnancy until parturition. Other factors could influence pregnancy maintenance. In the same way, not all mares in Category III were infertile. The endometrial biopsy was shown to be an easy and cheap diagnostic technique with minimal discomfort to the animals and, together with other data, to be a very important component in the investigation of mare fertility.

Efeito do mês dentro da estação da monta sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen fresco diluído / Effect of month within the breeding season upon fertility of mares inseminated with diluted fresh semen

Noventa e quatro ciclos, de cinqüenta e nove éguas foram analisados com objetivo de estudar o efeito do mês de ovulação sobre fertilidade de éguas inseminadas com sêmen fresco diluído. As éguas foram rufiadas e inseminadas às segundas, quartas e sextas-feiras, a partir de um folículo de 3,0 a 3,5 cm de diâmetro, com sêmen de apenas um garanhão de fertilidade comprovada, diluído para um volume inseminante de 10 ml com diluidor de mínima contaminação. Os ciclos foram agrupados de acordo com o mês de ovulação (novembro,dezembro, janeiro, fevereiro/março). As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, para os grupos novembro, dezembro, janeiro, fevereiro/março foram de 61,11% (11/18); 84,21% (16/19);55,56% (5/9); 53,85% (7/13), respectivamente, sem que houvesse diferenças entre estas (P>0,05). Após quatro ciclos, as taxas de concepção foram de 61,11% (11/18); 70,37% (19/27); 50,00% (8/16); 42,42% (14/33), respectivamente, na mesma ordem anterior (P>0,05). Entretanto, foi observada uma menor eficiência de prenhez no mês fevereiro/março. Conclui-se então que o mês de março foi o responsável pela menor fertilidade das éguas.

Efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen fresco diluído / Aging effects on fertility in mares inseminated with diluted fresh semen

Noventa e um ciclos estrais de sessenta éguas foram analisados com o objetivo de estudar o efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen fresco diluído. As éguas foram rufiadas e inseminadas às segundas, quartas e sextas-feiras, apresentando um folículo maior que 3,0 cm de diâmetro, com sêmen de apenas um garanhão de fertilidade comprovada, diluído para um volume inseminante de 10 mL com diluidor de mínima contaminação. De acordo com a idade, o resultado de cada ciclo foi agrupado nas seguintes faixas etárias: 4 a 6 anos, 7 a 10 anos, 11 a 14 anos e 15 a 16 anos de idade. As taxas de concepção ao primeiro ciclo foram, respectivamente, 72,73 por cento (8/11); 62,50 por cento (10/16); 66,67 por cento (12/18); 63,64 por cento (7/11) (P>0,05) e, após quatro ciclos, de 64,29 por cento (9/14); 60,71 por cento (17/28); 44,83 por cento (13/29); 50,00 por cento (10/20) (P>0,05). Conclui-se que nas condições utilizadas neste experimento, a idade da égua não influenciou a fertilidade quando da utilização de sêmen fresco diluído.